草草免费在线视频观看-97久久久人妻精品一区-另类日韩欧美亚洲专区-任你操免费在线视频国产十欧美

技術(shù)文章 / article 您的位置:網(wǎng)站首頁 > 技術(shù)文章 > 掌握方法合理使用ELISA試劑盒

掌握方法合理使用ELISA試劑盒

發(fā)布時間: 2022-04-22  點擊次數(shù): 1089次
  ELISA試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA),已知濃度的規(guī)范品、不知道濃度的樣品參加微孔酶標(biāo)板內(nèi)進行檢查。先將生物素符號的抗體一起溫育。洗刷后,參加親和素符號過的HRP。再通過溫育和洗刷,去掉未的酶物,然后參加底物A、B,和酶物一起效果。產(chǎn)生色彩。ELISA試劑盒色彩的深淺和樣品中的濃度呈比例關(guān)系。
 
  ELISA試劑盒的使用方法:
 
  一、雙抗體夾心法
 
  1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗滌,下同)。
 
  2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃ 孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。
 
  3. 加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小時,洗滌。
 
  4. 加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。
 
  5. 終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。
 
  6. 結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強,陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。
 
  二、間接法
 
  1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過夜;
 
  2.次日洗滌3次;
 
  3.加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時,洗滌;
 
  4.(同時做空白、陰性及陽性孔對照)于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)二抗體(抗抗體)0.1ml;
 
  5.37℃孵育35-60分鐘,洗滌;
 
  6.較后一遍用DDW洗滌。其余步驟同“雙抗體夾心法”的4、5、6。

聯(lián)


日本午夜免费观看视频| 精品香蕉一区二区在线| 日韩欧美一区二区亚洲| 一区二区三区18禁看| 亚洲综合日韩精品欧美综合区| 欧美区一区二在线播放| 操白丝女孩在线观看免费高清| 亚洲国产精品av在线观看 | 国产内射一级一片内射高清视频 | 熟女少妇久久一区二区三区| av国产熟妇露脸在线观看| 欧美大粗爽一区二区三区| 国产视频一区二区三区四区| 丰满熟女少妇一区二区三区| 日本欧美一区二区三区高清| 成人日韩在线播放视频| 色狠狠一区二区三区香蕉蜜桃| 偷自拍亚洲欧美一区二页| 99一级特黄色性生活片| 精产国品一二三区麻豆| 亚洲精品成人福利在线| 91人妻人人精品人人爽| 视频一区日韩经典中文字幕| 91福利视频日本免费看看| 免费在线成人激情视频| 国产av天堂一区二区三区粉嫩| 中文字幕高清免费日韩视频| 国产精品自拍杆香蕉视频| 伊人国产精选免费观看在线视频| 黄色在线免费高清观看| 日本淫片一区二区三区| 亚洲婷婷开心色四房播播| 久热久热精品视频在线观看| 国产女同精品一区二区| 九九热这里只有免费精品| 日韩三极片在线免费播放| 东北女人的逼操的舒服吗| 国产亚洲不卡一区二区| 91后入中出内射在线| 美女激情免费在线观看| 国产熟女高清一区二区|